细胞生长优势(以96孔板为例)
浙江聚立医疗科技有限公司
细胞培养板包括6孔、12孔、24孔、48孔、96孔、384孔系列板,主要用于细胞培养与增殖、药物筛选与毒性检测、Elisa等。
在细胞实验中,培养板起着至关重要的作用,不仅为细胞提供一个生长的环境,还直接影响到细胞的生长状态,细胞生长的状态直接关系到实验的准确性和可靠性,因此通常会选用经过TC处理的板,表面改性后更适合贴壁细胞的培养。
那么经过TC处理的培养板效果到底如何呢?让我们一起来揭秘吧。
以96孔板细胞增殖实验CCK-8法为例
实验步骤:
--用CCK-8试剂盒制作标准曲线(如图1)
图1:标准曲线
(1)准备细胞:根据常规细胞培养方法准备好所需细胞,通常每孔加入100微升大约2000个细胞,并接种到96孔培养板中;
(2)准备试剂:将CCK-8试剂从冰箱中取出,室温下平衡至室温;
(3)加入CCK-8试剂:培养至细胞贴壁充分后,向每孔细胞培养液中加入适量的CCK-8试剂(通常每100微升细胞培养液加入10微升CCK-8试剂)。可以用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照;
(4)孵育:将培养板放回培养箱中,在适当的温度下(通常为37℃) 孵育一定时间(一般为1- 4小时)。对于大多数情况孵育1小时即可;
(5)检测:使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的吸光度(OD值);
(6)结果分析:根据所测OD值,使用标准曲线或相关公式计算出细胞活力或细胞数量。
--测定96孔板细胞增殖情况(如图2)
图2:不同厂家96孔板细胞增殖48小时密度
(1)取生长状态良好的细胞,制备成一定浓度的细胞悬液(本次采用2×104cell/ml),每个孔加入100微升至96孔细胞培养板中;
(2)培养48小时后,每孔加入10微升的CCK-8溶液孵育1小时;
在450nm波长处测定各孔的吸光度,代入标准曲线中得出细胞浓度。
敲重点!!!
总结:从实验结果中能看出,相同条件下,聚立培养板的细胞增殖密度最高,很好地确保了细胞在培养过程中的最优生长情况。
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